Хромозомске абнормалности у хроничној мијелоидној леукемији: Пхиладелпхиа хромозом

Филаделфијски хромозом је карактеристичан за ЦМЛ или хронична мијелоидна леукемија што је клонска неоплазма која се развија из хематопоетских матичних ћелија.

Овај тумор је био први у коме је показивао знакове карактеристичног хромозомског маркера. Откриће 1960. године у Пхиладелпхији направили су амерички истраживачи ДА Хунгерфорд и ПЦ Новелл, у вези с којим се овај маркер назива изразом Пхиладелпхиа цхромосоме-Пх. Овај налаз је био почетак клиничке цитогенетике у онкологији.

Шта је хромозом?

Може се појавити код других типова леукемије. Филаделфијски хромозом је скраћени хромозом који је члан групе малих акроцентрика. Свака нормална женска ћелија ове групе садржи 2 пара њих - 21 и 22, али мушка ћелија не садржи четири, већ пет таквих хромозома, јер је поред 21 и 22 пара укључен и И хромозом.

Без Г-савијања, тј. Са нормалном бојом, Пх-хромозом се детектује код скоро сваког пацијента који пати од ЦМЛ-а, наиме у 95-98% случајева. На хромозомима који су различито обојени, јасно је да је један од 22 пара скраћен.

Који је проценат откривања?

Приближно у 90% пацијената видљиво је у свакој анализираној метафази, док су код преосталих пацијената откривене обје станице са Пх-кромосомом и нормалним станицама.

Поред тога, у неким случајевима, Пх-хромозом је регистрован у мањини ћелија коштане сржи. Транслокација (9; 22) је уочена у мегакариоцитима, мијелоидним ћелијама, Б- и Т-лимфоцитима, еритробластима. Ова чињеница је доказ да болест потиче од претходника хематопоезе, необавештене ћелије.

Чувени амерички научник ЈД Ровлеи 1973. године успоставио је формирање Пхиладелпхиа хромозома због уравнотежене транслокације хромозома 9 и 22 (одељци 22клл и 9к34), и не као резултат брисања хромозома 22. Поред тога, формирају се два маркерска хромозома, која су означена на следећи начин: 9к + и 22к- (Пх). Понекад је могуће посматрати прерасподеле које скривају скраћени 22 хромозома, такозвани скривени Пх хромозом, тј. Мали фрагмент који се одвојио од било ког кромосома може да се "залепи" за разбијени хромозом и разбије "маскирање". Таква маска је довољно једноставна да открије са различитом бојом. Да ли је ЦЦМ обавезан са хромозомом из Филаделфије? Ово питање се често поставља. Ова анализа је веома информативна.

Атипицал Транслоцатионс

У приближно 10% случајева могу се примијетити атипичне транслокације, када стандардно цитолошко испитивање може омогућити да се види пријенос дијела 22 кромосома на 9, али на било који други. Штавише, у неким случајевима са ЦМЛ, комплексне Пх-транслокације се детектују уз учешће не 3 (22 и 9 хромозома), већ 3 или више хромозома.

Утврђено је да су 9 и 22 хромозома укључени у скоро сваку Пх транслокацију, али то није увек могуће видети када се обављају стандардна цитогенетска истраживања, али то се може наћи током примене ПЦР и ФИСХ.

Бројни истраживачи сматрају да врста Пх-транслокације (комплексна, атипична, стандардна) нема клиничку вриједност.

Гене бреакдовн

Употреба молекуларно генетских метода допринела је открићу да јаз у хромозому 9 пролази кроз прото-онкоген (ген за АБЛ), који је претходно идентификован код мишева у једном од вируса леукемије. У 22. хромозому је уочен прекид БЦР гена. Резултат фузије БЦР и АБЛ фрагмената гена је формирање химерног БЦР-АБЛ гена, који се обично налази на 22. избрисаном хромозому.

Како Пхиладелпхиа хромозом узрокује леукемију?

Приближно 70% случајева карактерише детекција продукта другог химерног гена поред БЦР-АБЛ транскрипта, који се формира због т (9; 22) —АБЛ-БЦР на дер (9), али његова улога у развоју хроничне мијелоичне леукемије није разјашњена.

Брисање

Такође је установљена веома важна чињеница: отприлике 20-25% пацијената који су имали хроничну миелоидну леукемију имају делецију у маркер 9к + хромозому. Ова аномалија се не може открити једноставном анализом хромозома, али је можете видети док користите ФИСХ са сондама које су специјално дизајниране.

Величина делеције варира код сваког пацијента: место делеције може да садржи секвенце БЦР гена који се преносе из хромозома 22 у хромозом 9, секвенце на сам хромозом 9, или оба.

Појава делеције са формирањем специфичног т (9; 22) је такође утврђена у исто време када је његова учесталост у групама пацијената који су прегледани у различитим стадијима хроничне мијелоидне леукемије исти.

До сада, употреба ове дијагностичке методе (информативне прогнозе), нажалост, није ушла у широку клиничку праксу због своје сложености и потребе за скупом опремом и реагенсима.

Њена улога у прогресији ЦМЛ-а

Брисање маркера 9к + игра важну улогу у прогресији ЦМЛ-а, али још увек није потпуно разјашњено. Када су АБЛ или БЦР кодирајуће секвенце испуштене због делеције, то резултира експресијом само једног химерног БЦР-АБЛ гена, али не долази до експресије АБЛ-БЦР гена. Вероватно овај догађај такође игра важну улогу у прогресији леукемије. Штавише, истраживачи расправљају о могућности инактивације још непознатих супресорских гена, који су локализовани у региону хромозомске делеције.

Протеин из мол. 210 хиљада је кодирано од стране химерног БЦР-АБЛ гена, који поседује већу активност протеин киназе од нормалног АБТ (Х145) прото-онкогенског производа. Током леукемије, која је код мишева изазвана Абелсон вирусом, онкогена активност је протеин, производ гаг / абл хибридног гена, који има високу активност протеин киназе. Експериментом је извршена ексцизија гаг / абл гена, након чега вирус више није могао изазвати леукемију код мишева. То јест, хромозом из Филаделфије је маркер ове болести.

Више о генима БЦР и АБЛ

Код проучавања БЦР и АБЛ гена за руптуре у ЦМЛ, утврђено је да њихови пацијенти имају различиту локализацију. На пример, у гену АБЛ, дужина деонице где може да дође до прелома је велика, до 200 кб, ау БЦР-гену паузе су локализоване у малом делу од 8.5кб, што значи, можете говорити о присуству групе прекида која је дала име самом БЦР-у. - Регија кластера прекида.

У многим случајевима, т (9; 22) прекида БЦР гена су пронађени на М-БЦР месту, са дугим делом БЦР гена који је инкорпориран у химерни ген, што је резултирало појавом протеина карактеристичног за ЦМЛ П210Бцр / Абл. Поред тога, на т (9; 22), прекиди у БЦР гену могу бити локализовани на местима званим м-бцр и у-бцр. Преломе Бм-бцр региона доводе до формирања П190Бцр / Абл химерног протеина, који је мањи од П210Бцр / Абл. Локализација прекида у у-бцр доводи до формирања већег П230Бцр / Абл протеина.

Ове молекуларне разлике нису стриктно повезане са клиничким карактеристикама леукемије. На пример, Р190Бцр / Абл је присутан у 2 различита типа леукемије: Пх-позитивни лимфобластни акутна леукемија и гранулоцитну хроничну леукемију са израженом моноцитозом и мијелопластичним особинама. Ако се открије Р230Бцр / Абл, тада се може приметити слика неутрофилне хроничне мијелоидне леукемије, то јест, мијелоидне леукемије, за коју је формула крви представљена појединачним метамилоцитима и зрелим неутрофилима. Поред тога, име неутрофилне гранулоцитне леукемије се дуго користи за одређивање Пх (БЦР-АБЛ) -негативне хроничне мијелоидне леукемије (релативно бенигна варијанта виђена код старијих и понекад код адолесцената).

Било који од горе наведених протеина може се детектовати у хроничној мијелоидној леукемији. Веома честа је комбинација 2 типа протеина (Р1900Бцр / Абл и Р210Бцр / Абл) у лимфоцитној леукемији и хроничној типичној мијелоидној леукемији.

Истраживачи не знају стварну учесталост БЦР-АБЛ протеина "атипичне" пи у присуству типичне хроничне мијелоидне леукемије, јер нису спровели опсежно истраживање.

Улога БЦР-АБЛ у развоју хроничне мијелоидне леукемије

Кључна улога БЦР-АБЛ гена и његовог производа, односно протеина П210 за развој хроничне мијелоидне леукемије, показана је на различитим системима ин витро и ин виво. На пример, са трансдукцијом бцр / абл у хематопоетске матичне ћелије мишева и њиховом каснијом трансплантацијом синергичним озраченим животињама, ово друго развија миелопролиферативну болест, сличну хроничној хуманој мијелоидној леукемији. Утврђено је да онкогени потенцијал изазива високу активност тирозин киназе кимерног протеина БЦР-АБЛ. Једна од централних у малигној трансформацији ћелија је дерегулација активности тирозин киназе.

Када су истраживачи убризгали ћелије које су изразиле п210Бцр / Абл смртоносним озраченим мишевима, неке животиње су развиле леукемију сличну људској хроничној мијелоидној леукемији, а друге из различитих хематопоетских неоплазми: еритроидних тумора, мијеломоноцитних леукемија, ретикулоцитних саркома, пре-Б и Т-ћелија, Т-ћелија и Т-ћелија. лимфоми, тумори макрофага. Разлог за разлике није утврђен. Такви експерименти показују да читав ланац догађаја који је довео до развоја хроничне мијелоидне леукемије још није установљен. Али чињеница остаје. У овој болести, у ћелијама коштане сржи се открива Пхиладелпхиа хромозом. Третман ће бити разматран у наставку.

Шта сте још пронашли код пацијената?

Добијени су подаци који указују на значајно повећање масе хематопоетских ћелија и крвних елемената у телу болесника са хроничном мијелоидном леукемијом, углавном због наглог повећања животног века таквих ћелија, јер активирани ген АБЛ (у БЦР-АБЛ гену) инхибира апоптозу - програмирану ћелију смрти Поред тога, овај ген побољшава пролиферацију миелоидних ћелија.

Постоји разлог да се верује да је у случају хроничне мијелоидне леукемије функција спец. ћелијски протеини, тј. интергини, који доводе до нарушене адхезије на стромалне елементе младих миелоидних ћелија, и ћелијске леукемијске ћелије се такође избегавају негативним регулаторним утицајима. Може се закључити. Присуство Пхиладелпхиа хромозома је патогномонично за хроничну мијелоидну леукемију.

Закључци

Најчешћа формулација молекуларне патогенезе је следећа: химерни БЦР-АБЛ ген кодира протеин који стално активира активност тирозин киназе, што доводи до активације великог броја сигналних путева, као и изражених промена у апоптози, адхезији и ћелијском циклусу. Верује се да су ови догађаји довољни за одређивање малигне ћелијске трансформације и одржавање фенотипа тумора.

Ипак, главни маркер је хромозом из Филаделфије.

Третман

Да би се сузбила активност патолошких леукоцита неопходних за спасавање живота пацијената, потребна им је друга линија терапије. Да би се то урадило, користи се нилотиниб - супстанца која блокира пренос сигнала из Пхиладелпхиа хромозома.

На крају крајева, то је оно што узрокује да коштана срж у великом броју производи оштећене леукоците.

Стручњацима се додјељују 3 корака. Прво се постиже хематолошка ремисија, нормализација крвног теста и стање пацијента (величина његове слезине).

Али Пхиладелпхиа хромозом остаје у ћелијама. Друго, цитогенетска ремисија се постиже када овај хромозом није детектован у ћелијама. Треће, када се проводе молекуларне студије крвних станица као резултат изложености инхибиторима тироксин киназе, коштана срж не детектира патолошки ген.

Трансплантација коштане сржи

Да ли је везивање ТЦМ на хромозому Пхиладелпхије? Таква трансплантација се изводи код пацијената са акутном мијелоидном леукемијом. Такође, заиста компатибилан донатор може бити тешко пронаћи. Ово је веома озбиљна и дуготрајна операција. Али то вам омогућава да вратите нормалан рад коштане сржи.