ЕЛИСА: декодирање, методе

Развојем таквих сродних наука као што су генетика, молекуларна биологија, хемија, као и раст техничког напретка, савремена медицина може се похвалити иновативним методама за дијагностиковање различитих болести људи. Одликују их висока тачност резултата и сигурност рада. Један од ових начина за идентификовање здравствених проблема је ензимски имунотест. Она је стекла широку популарност током протекле деценије и стекла репутацију високо ефикасне, поуздане и сигурне методе за откривање болести чак и прије појаве вањских симптома. Јасно ћемо објаснити шта је овај тип дијагнозе, који је принцип њеног функционисања, уочити предности, оријентисати је на цену такве анализе.

Реакција организма на патогену флору

Да би разумели како, захваљујући имуноанализи ензима, лабораторијски техничари дијагностикују различите болести, неопходно је разумети физиолошки процес који се јавља у организму током инфекције. Када патоген уђе у крвоток, људски имуни систем показује заштитну реакцију у облику ослобађања одређених супстанци - антитела. Они се вежу за ћелију и анализирају да ли је она део тела или инкорпорирана споља. Ако имуни систем одређено да је ћелија ванземаљска, онда количина антитела почиње да расте како би се борила против патогеног микроорганизма.

Антитела су различитих типова, имају своје карактеристике. Неке супстанце се јављају директно током периода инфекције, друге остају током живота у људском телу и захваљујући њима оне развијају снажан имунитет на одређену болест. Структуре протеина се деле на такве врсте: А, Д, Е, М, Г. У медицини, антитела се називају имуноглобулини. Према томе, уобичајено је да се карактеристике ових супстанци означавају латиничним словима Иг.

Иммуноассаи анализа (ЕЛИСА) Заснива се на подацима из медицинског знања. Користећи специјалне антигене у лабораторији, можете одредити присуство или одсуство одређених антитела у биолошком материјалу. Према резултатима ове анализе, лекар може да постави дијагнозу, као и да утврди не само присуство патологије, већ и трајање његовог порекла, да би идентификовао ниво опасности за пацијента. У ензимском имунотесту, присуство антитела група М и Г се чешће испитује.

Шта је ЕЛИСА?

У ствари, ензимски имунотест није иновација модерног друштва. Измишљен је 80-их година. Али за такве студије била је потребна скупа опрема. Стога је овај метод коришћен само у посебно опремљеним научним лабораторијама: коришћен је за типизацију ћелија и ткива. Али у то време није се нашироко користила у дијагностичкој медицини, било је технички тешко и изузетно скупо за њено коришћење. Само развојем технологије и проналаском биополимерних материјала, ЕЛИСА се побољшала. Након тога, метода је постала популарна и стекла повјерење у медицинске кругове.

Као што је горе поменуто, овај метод укључује детекцију у биоматеријалу - крви, амнионској течности, стакластом телу или цереброспиналној течности - одређеним групама имуноглобулина.

Постоје студије без примене антигена на површинском и ензимски везаном имуносорбентском тесту, што подразумева спровођење реакције у специјалним бунарима. Ова друга метода има већу осетљивост и поузданост, тако да се на тај начин анализирају у медицинским лабораторијама за откривање болести људи.

Пхасе Иммуноассаи

У зависности од жељене болести, ензимски имунолошки комплет користи неопходни антиген, који ће током хемијске реакције у присуству инфекције контактирати патогену флору. Овај процес се назива спровођење имуног одговора.

Затим, да би се визуелно одредио резултат студије, спровести ензимску фазу ЕЛИСА. Укључује бојење материјала помоћу специјалних реагенса. Ензими као што су алкална фосфатаза, пероксидаза и авидин се користе у овој студији. У зависности од резултујуће боје у процесу извођења хемијских реакција и одређивања резултата ензимског имуноесеја.

Шта је колориметрија?

Анализа ензимске фазе дијагнозе врши се методом која има назив "колориметрија". Чињеница је да не само боја материјала даје информације о инфекцији, већ и густину боје која је резултат хемијских реакција. Овај индикатор одређује концентрацију патогена. Ако се ручна метода дијагностике користи на старински начин, тада се конструише посебан калибрациони графикон да се одреде назначени индикатори.

У савременим лабораторијама, мануелна метода се данас ретко користи. За анализу ЕЛИСА-е користи се посебан уређај - колориметар, у којем се ручно подешавају само параметри студије, а затим уређај аутоматски обавља све радове, укључујући цртање.

ЕЛИСА методе

Постоје директни и индиректни методи имуноанализа ензима. Први тип траје мање времена, јер има само три фазе имплементације. Прво, антигенима испитиваног материјала додају се специфична антитела, која се смештају у посебне бунаре. Затим уклоните њихову сувишну количину и спроведите ензимску фазу анализе, на тај начин добивши резултат.

Индиректна метода се користи много чешће, јер има већу осетљивост у поређењу са директном методом дијагнозе. Приликом његовог спровођења користи се двоструко истраживање. Наиме - прво, антиген је повезан са необиљеженим антителом, а затим са обележеним. Овај процес траје више времена, али резултат је најпрецизнији.

Реагенс Китс

Комплети за имуно тестирање производе различити произвођачи, у различитим нивоима опреме. У Русији, призната компанија је Унија биомедицинских. Овај произвођач производи сетове реагенса за проучавање методом ЕЛИСА за готово све уобичајене инфекције у нашим географским ширинама, које се могу анализирати на овај начин. Поред самих реагенса, комплети садрже и додатне материјале који осигуравају сигурност, практичност и брзину анализе. Поред тога, хемијске супстанце су обојене у различитим бојама, што смањује вероватноћу грешака у избору реагенс лабораторије.

Кемијско-биолошки комплети се разликују у релативној доступности, што директно утиче на дистрибуцију и доступност ензимског имунолошког теста за популацију.

Предности дијагностичке методе

Без сумње, ензимски имунотест има неколико предности у односу на друге дијагностичке методе:

1. Уз његову помоћ, може се одредити и мало присуство патогених организама, што указује на високу осетљивост теста.
2. Могућност откривања болести у најранијим фазама, што значајно повећава шансе за успјешан опоравак.
3. Једноставност и практичност узимања биолошког материјала. Ова анализа се спроводи иу приватним лабораторијама иу јавности. Ако је потребно, медицинска сестра може узети материјал од пацијента код куће.
4. За анализу је потребна веома мала количина биоматеријала.
5. Брзи резултати. Модерна медицинска опрема вам омогућава да извршите анализу у току једног дана.
6. Способност откривања скривених асимптоматских облика инфекције.
7. Студија приступачности.
8. Ако је потребно, могуће је спровести масовна истраживања коришћењем ове методе.
9. Постоји могућност праћења тијека болести и дјелотворности прописаног лијечења, јер је могуће ЕЛИСА анализу много пута апсолутно сигурно за пацијента.
10. Аутоматизација фаза анализе која елиминише људски фактор и повећава поузданост резултата.
11. Реагенси за извођење ИФА се складиште довољно дуго - око годину дана.
12. Анализа је могућа уз флуктуације температуре околине.

Група М имуноглобулина

Антитела групе М производи имуни систем одмах након детекције страног антигена. Сходно томе, ако је ензимски имунолошки тест завршен детекцијом таквих супстанци у биоматеријалу, то указује на акутну фазу болести, примарну инфекцију. Имуноглобулини групе М могу бити у тијелу до мјесец дана у зависности од типа инфекције. Тада се њихов број смањује до потпуног изумирања.

Група Г имуноглобулини

Замењена имуноглобулинском групом М јавља се протеинска структура облика Г. Ове супстанце производе јак, у већини случајева, доживотни имунитет на болест. Одређивање протеинске структуре ИгГ у испитиваном материјалу указује да се тело претходно сусрело са патогеном и да има заштитну реакцију против реинфекције.

Индикације за дијагнозу

Ензимски имунотест се користи за одређивање различитих инфективних болести, хормонских стања и алергијских тестова. Наиме:

• одредити ниво тироидних хормона;
• индикатори репродуктивног хормонског панела;
• онцомаркерс;
• детектују инфективне агенсе као што су цитомегаловирус, хепатитис, токсоплазма, рубела, оспице, туберкулоза, хламидија, сифилис, микоплазма, уреплазма, цандида, гиардиа, па чак и ХИВ;
• се дијагностицира аутоимуне болести. Укључујући често кориштене за проучавање хормона штитне жлезде ензимски имуносорбентни тест: ТСХ, ТГ, Т3 и Т4.

Осим у дијагностичке сврхе, метода имуноанализа ензима се користи у медицинским истраживачким активностима.

Како се узима материјал?

У већини случајева за анализу се препоручује узимање узорака венске крви. Након обраде и припреме материјала за испитивање, врши се имунолошки тест. крвни серум или плазма.

Проучавање хормонског панела захтева посебну пажњу, јер је у овом случају изузетно важно узети у обзир особине уноса материјала. На пример, дијагноза већине хормона женског репродуктивног система захтева венску крв да се узима у одређеним данима менструалног циклуса. На бројне друге хормоне утичу спољни фактори: сезоналност, доба дана, психолошко стање пацијента и још много тога. Не узимајући у обзир специфичне факторе, можете добити лажни резултат, који ће довести до погоршања болести или неправилно прописаног лијечења.

У неким, чешће компликованим случајевима, цереброспинална течност, стакласто или амнионска течност трудне жене може бити потребна за анализу. Процедуре за прикупљање ових биолошких материјала носе одређени ризик, имају контраиндикације и период опоравка. Према томе, требало би да се спроводи само према сведочењу лекара и под његовим стручним надзором ензимски имунотест. Декодирање у овом случају захтијева посебно медицинско знање и може потрајати неко вријеме.

Припрема за анализу

Имуноанализу ензима треба спровести, придржавајући се свих препорука, јер вањски фактори утичу на резултате истраживања. На пример, важно је да се ујутру узме венска крв на празан стомак (до 11 сати). 2 недеље пре планираног сакупљања материјала, морате престати са узимањем било каквих лекова, посебно хормонских. Неколико дана пре студије требало би да се уздрже од употребе алкохола и масне хране, као и да се елиминишу физички напори, искуства и стрес.

Резултати декодирања

Декодирање резултата ензимског имунотестирања захтева посебно познавање специфичности протеинских структура (антитела), које су описане горе (ИгГ и ИгМ). У складу са овим подацима анализирају се индикатори истраживања. Табела описује опције које се могу добити током анализе:

Анализирајући приказану табелу, можемо закључити да ће у већини случајева бити потребне додатне студије како би се потврдила дијагноза. Не може дати јасан одговор само на ензимски имунотест. Норма у овом случају нема јасне границе: детектовани протеини групе Г указују само на то да је организам претходно био изложен инфекцији одређеним патогеном. Али исти резултат може указивати на присутност акутне фазе - важно је упоредити многе факторе и показатеље како би се поставила исправна дијагноза.

Фактори ризика

ЕЛИСА је 90% тачна. Ипак, постоје фактори ризика који утичу на нарушавање дијагностичког резултата: квар на опреми, неправилно прикупљање материјала, његово складиштење и транспорт и занемаривање других спољних фактора.

Не препоручује се обављање дијагностике након трансфузије крви, хемолизе, хируршке интервенције, биопсије или пункције биолошког материјала - то може утицати и на резултате индикатора.

Трошкови анализе

Трошак дијагностичке студије има велики распон и зависи од типа анализе и антигена који ће се одредити, будући да се на основу ових фактора израчунава трошак комплета реагенса и одређује сложеност анализе. Али у већини случајева, ЕЛИСА је доступна многим пацијентима. Њена цена се креће од 300 п. до 2000 стр.

ЕЛИСА је приступачна, брза и високо ефикасна метода за дијагностицирање велике листе болести. Али само квалификовани медицински стручњак има право да се бави тумачењем резултата и дијагнозе.